酶聯(lián)產(chǎn)品

科研ELISA 科研人Elisa 科研大鼠Elisa 科研小鼠Elisa 科研兔Elisa 科研豬Elisa 科研雞Elisa

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PCR試劑盒 PCR檢測試劑盒探針法qPCR試劑盒

生化試劑盒氧化磷酸化系列植物激素系列氧化與抗氧化系列果膠系列輔酶Ⅱ系列谷胱甘肽系列維生素C代謝系列氮代謝系列氨基酸代謝系列酯酶系列三羧酸循環(huán)系列糖酵解系列蛋白酶系列脂肪酸代謝系列淀粉系列蔗糖系列糖代謝系列 P450系列離子系列土壤系列信號系列其它系列蛋白含量測定系列糖異生系列糖原系列維生素系列光合作用系列輔酶Ⅰ系列花青素合成系列乙醛酸循環(huán)系列海藻糖系列

酶聯(lián)抗體一抗內(nèi)參抗體抗體相關支持試劑標簽抗體

二抗 AP標記二抗 Biotin標記二抗 HRP標記二抗 PE標記二抗熒光標記二抗其他二抗

細胞系人細胞系豬細胞系猴細胞系小鼠細胞系大鼠細胞系其他細胞系

原代細胞人原代細胞大鼠原代細胞小鼠原代細胞兔原代細胞豬原代細胞其他原代細胞雞原代細胞

細胞專用培養(yǎng)基基礎培養(yǎng)基兔細胞專用培養(yǎng)基人細胞專用培養(yǎng)基細胞系專用培養(yǎng)基小鼠細胞專用培養(yǎng)基大鼠細胞專用培養(yǎng)基其他細胞專用培養(yǎng)基 LUC細胞專用培養(yǎng)基永生化細胞專用培養(yǎng)基

細胞庫菌株細胞株永生化細胞耐藥細胞株熒光示蹤穩(wěn)株 luc示蹤細胞株細胞凍存液

病理染色液 HE染色骨組織染色碳水化合物染色固定液結(jié)締組織染色脫鈣液酶類染色細胞染色植物染色指示劑其他染色微生物染色核酸染色金屬及鹽染色神經(jīng)染色脂類染色色素染色

酶標儀酶標儀洗板機

其他試劑盒其他產(chǎn)品

細胞生物學試劑抗生素細胞檢測細胞培養(yǎng) 細胞其他細胞組分分離

免疫學試劑免疫學試劑

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酶聯(lián)免疫吸附實驗（elisa）原理及步驟詳解

如何快速、準確地檢測目標蛋白？ELISA技術，憑借其高靈敏度、高特異性、操作簡便和高通量等優(yōu)勢，提供了一種可靠的解決方案。理解其原理和步驟是正確操作和準確解讀結(jié)果的關鍵。   <h3>　　酶聯(lián)免疫吸附實驗<o:p></o:p></h3>   　　原理：免疫分析是利用抗體和抗原特異性結(jié)合原理，對樣本中目標抗原或抗體進行定性和定量檢測。酶聯(lián)免疫吸附實驗是免疫分析一種，分三部分組成：免疫識別、信號輸出和數(shù)據(jù)處理。<o:p></o:p>   　　步驟：首先，將抗原或抗體包被在96微孔板上。然后，加入待測樣本，使待測的抗原或抗體與包被的分子結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入帶有標記物（如辣根過氧化物酶HRP、熒光分子或放射性同位素）的抗體（直接法）或二抗（間接法）。再次洗滌后，加入相應的底物，使酶催化底物顯色或發(fā)光。通過檢測信號強度，并與已知濃度的標準品繪制的標準曲線進行比較，最終計算得出待測樣本中目標抗原或抗體的濃度。<o:p></o:p>  <img src="/images/upload/Image/ELISA原理.png" alt="elisa原理" width="500" height="193" /> 　　分類：Elisa從檢測方法上分為直接elisa、間接elisa、夾心elisa和競爭elisa。每種方法在檢測步驟上有所區(qū)別，比較常見是夾心法。<o:p></o:p>   　　①抗體包被:將捕獲抗體加入96孔酶標板中進行包被。抗體主要通過疏水作用和靜電作用吸附到聚苯乙烯板表面。包被完成后，洗滌去除未結(jié)合的抗體，然后加入封閉液（例如含有明膠或牛血清蛋白BSA的溶液）封閉板孔中未結(jié)合的位點，以減少非特異性吸附。<o:p></o:p>   　　②免疫識別:加入待測樣品，并在37°C下孵育1-2小時（具體時間需根據(jù)實驗優(yōu)化）。在此期間，樣品中的抗原會與包被的捕獲抗體特異性結(jié)合。選擇高特異性和高親和力的捕獲抗體以及合適的樣品預處理方法至關重要。<o:p></o:p>   　　③洗板:洗滌去除未結(jié)合的抗原，然后加入檢測抗體，并在37°C下繼續(xù)孵育1-2小時（具體時間需根據(jù)實驗優(yōu)化）。檢測抗體與捕獲抗體識別抗原的不同表位。孵育結(jié)束后，洗滌去除未結(jié)合的檢測抗體。<o:p></o:p>   　　④酶標信號輸出:加入帶有辣根過氧化物酶(HRP)標記的酶標二抗，使其與檢測抗體結(jié)合。在37°C下孵育30分鐘（或根據(jù)說明書）后，洗滌去除未結(jié)合的二抗。最后，加入顯色底物，酶催化底物顯色。通過酶標儀測定顯色反應的吸光度值，并與使用已知濃度標準品繪制的標準曲線進行比較，最終計算得出待測樣品中抗原的濃度。<o:p></o:p>   　　ELISA利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理，并通過酶聯(lián)反應進行信號放大，經(jīng)過一系列的孵育和洗滌步驟，最終實現(xiàn)對目標抗原或抗體的定量或定性檢測。為確保ELISA實驗結(jié)果的可靠性，需要選擇高特異性和高親和力的抗體，并嚴格遵守操作規(guī)范，包括正確的洗滌步驟、精確的孵育時間和有效的封閉措施。此外，建議在實驗中加入陽性和陰性對照，進行必要的質(zhì)控。掌握ELISA的原理和步驟，對于正確進行實驗和解讀結(jié)果至關重要。 　　<o:p></o:p>

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