酶聯(lián)生物經(jīng)過(guò)不斷的實(shí)驗(yàn)優(yōu)化和改進(jìn)，積累了大量的經(jīng)驗(yàn)，擁有專業(yè)的酶聯(lián)研發(fā)團(tuán)隊(duì)。利用專業(yè)的酶聯(lián)免疫技術(shù)自主研發(fā)的elisa試劑盒，能對(duì)血清及其它樣本定量檢測(cè)抗原，定性檢測(cè)特異性抗體。優(yōu)質(zhì)的試劑，先進(jìn)的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA檢測(cè)的方便性、穩(wěn)定性、重復(fù)性和可靠性方面都具有很大的優(yōu)勢(shì)。
ELISA檢測(cè)技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
1、雙抗體夾心法檢測(cè)抗原 2、間接法檢測(cè)抗體 3、為客戶提供各種ELISA技術(shù)進(jìn)行樣本檢測(cè)。
以上代測(cè)費(fèi)，凡購(gòu)買(mǎi)本公司試劑盒，我們免費(fèi)代測(cè)！
凡購(gòu)買(mǎi)本公司目錄任何一種酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒，您只需將需要檢測(cè)的動(dòng)物（Human, Rat, Mouse, Rabbit, Monkey,
Pig……）種類和檢測(cè)指標(biāo)（白介素類、激素類）及標(biāo)本數(shù)量（48T/96T）通知公司業(yè)務(wù)員即可。在接到客戶標(biāo)本當(dāng)日起，現(xiàn)貨產(chǎn)品一周內(nèi)將檢測(cè)報(bào)告交到客戶手中！
歡迎各科研單位在各種項(xiàng)目上與我們公司開(kāi)展不同層次的密切合作，以雙贏求發(fā)展，共同進(jìn)步，為中國(guó)檢測(cè)事業(yè)的發(fā)展積累經(jīng)驗(yàn)。
二、樣本要求
在收集標(biāo)本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃，必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。我們提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測(cè)，對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本，及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶?biāo)本，請(qǐng)?jiān)炷Ｈ〔暮螅瑢?biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差，蛋白極易降解，直接影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量，所以避免反復(fù)凍融。代測(cè)放免標(biāo)本的客戶取材前須向我司銷售人員索要說(shuō)明書(shū)，具體操作注意事項(xiàng)請(qǐng)與我司技術(shù)人員溝通。
液體類標(biāo)本：標(biāo)本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。
血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
血漿：應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，加入10%（v/v）抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1%heparin
或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
尿液、胸腹水、腦脊液：用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.0-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin（抑肽酶）。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清置于-20度或-70度保存，如有必要，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
三、寄標(biāo)本時(shí)需注明以下情況：
1、標(biāo)本編號(hào)；2、所測(cè)項(xiàng)目；3、是否做復(fù)孔；3、聯(lián)系方式；4、實(shí)驗(yàn)后標(biāo)本是否寄回。
客戶須知：
客戶應(yīng)對(duì)所提供的材料及信息負(fù)責(zé)，如因客戶提供的材料及信息不準(zhǔn)確而引起的實(shí)驗(yàn)延誤或經(jīng)濟(jì)損失由客戶承擔(dān)。
PCR試劑盒成功的重要要素及注意事項(xiàng)
模板降解
1. 盡量選擇新鮮提取的模板進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增，通過(guò)凝膠電泳檢測(cè)模板的完整性，若降解嚴(yán)重需要重新制備模板。
2. 模板避免反復(fù)凍融。
模板中含有抑制 DNA 聚合酶活性的抑制劑
1. 采用離心柱法提取核酸，純化模板，消除抑制劑的干擾。
2. 適當(dāng)減少模板量，采用梯度稀釋摸索最佳模板量。
3. 選用抗逆性強(qiáng)的 DNA 聚合酶。
模板量太低
1. 適當(dāng)增加模板量。
2. 模板為 cDNA 時(shí)，選用目的基因表達(dá)量高的組織提取高質(zhì)量 RNA 并選用基因克隆專用的反轉(zhuǎn)錄試劑盒得到的 cDNA 作為模板。
3. 選用靈敏度高的 DNA 聚合酶。
高GC, 復(fù)雜模板
1. 使用 PCR 添加劑（比如 DMSO，甜菜堿）或 GC enhancer，促進(jìn)高 GC，復(fù)雜序列模板雙鏈解離從而有利于引物退火和序列延伸。
2. 增加變性時(shí)間或溫度，使 DNA 雙鏈徹底解離。
3. 選用適用于高 GC，復(fù)雜模板擴(kuò)增的 DNA 聚合酶。
長(zhǎng)片段
1. 確保模板的完整性。
2. 選擇適用于長(zhǎng)片段擴(kuò)增的 Taq DNA 聚合酶或者超強(qiáng)高保真 DNA 聚合酶。
3. 在試劑盒說(shuō)明書(shū)建議的延伸速度基礎(chǔ)上適當(dāng)延長(zhǎng)延伸時(shí)間。
4. 采用抑制熱交錯(cuò) PCR（Suppression Thermo-Interlaced PCR, STI PCR）策略。
引物降解
重新合成高質(zhì)量引物，少量分裝保存，防止多次凍融，避免長(zhǎng)期置于冰箱冷藏部分。
引物設(shè)計(jì)不合理
1. 建議使用引物設(shè)計(jì)軟件（比如Primer premier 6, Oligo 7等）設(shè)計(jì)并選取評(píng)分較高的引物。
2. 確保引物和模板結(jié)合的特異性。
DNA 聚合酶及其他反應(yīng)組分
1. DNA 聚合酶選擇不合適
2. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇合適的 DNA 聚合酶，比如分子克隆實(shí)驗(yàn)中涉及到序列的高保真擴(kuò)增，需要選擇一款針對(duì)不同類型序列具有普適性的高保真酶。
DNA 聚合酶活力下降
檢查試劑是否過(guò)期，按照說(shuō)明書(shū)要求合理保存試劑。
反應(yīng)緩沖液體系與目的基因不匹配
不同目的 PCR 反應(yīng)要求反應(yīng)緩沖液中的鎂離子、鉀離子、銨離子、化學(xué)添加劑等成分濃度是不一樣的，建議使用試劑盒中優(yōu)化好的緩沖液體系。
反應(yīng)條件
退火溫度不合適，影響引物與模板特異結(jié)合
1. 使用引物設(shè)計(jì)軟件建議的退火溫度，退火溫度一般比引物的 Tm 值低 5 ℃。
2. 不同的試劑鹽離子濃度不同，最佳的退火溫度可能存在差異，建議以軟件建議退火溫度為中心設(shè)置溫度梯度，來(lái)獲得最佳退火溫度。
3. 設(shè)置降落 PCR（Step-down）反應(yīng)程序。
其他反應(yīng)條件不合適
不同的 DNA 聚合酶試劑最佳反應(yīng)條件是有差別的，選用試劑說(shuō)明書(shū)建議的變性溫度和時(shí)間，退火時(shí)間，延伸溫度和速度，循環(huán)數(shù)。
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