HSPC-1人造血干細胞
基本信息 ：
產品品牌 ：酶聯生物
中文名稱 ：人造血干細胞
細胞簡稱 ：H SPC-1
生長特性 ：懸浮細胞
培養環境 ：空氣，95% ；CO2，5% 37℃
凍存條件 ：55% 基礎培養基+40% FBS+5% D M SO液氮
完全培養基 ：RPM I-1640(P M 150110)＋10% F B S(164210-50)＋1% P /S(P B 180120)
傳代步驟 ：
可通過補充新鮮培養基或者離心換液兩種方式維持培養，離心轉速參考1200 rpm （250g左右），離心3分鐘
傳代比例（密度） ：1:2-1:4
換液頻次 ：2~ 3次/周
細胞背景描述 ：
細胞類型 ：正常細胞
收到常溫細胞后如何處理 ：
細胞培養詳細操作步驟請參照酶聯生物細胞培養操作指南
1. 收到常溫細胞后，及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現象。
2. 用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。先不要打開培養瓶蓋，將細胞置于細胞培養箱內靜置培養2-4小時，以便穩定細胞狀態。
3. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態、所用基礎培養基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后，取出細胞培養瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態（所拍照片 將作為后續服務依據）；建議細胞傳代培養后，定期拍照、記錄細胞生長狀態。
5. 若觀察到異?；蛘邔毎幸蓡?，請及時跟我們聯系；對于細胞培養操作及培養。可跟我們的技術支持交流。
用戶評論(共6條評論)
酶聯生物經過不斷的實驗優化和改進，積累了大量的經驗，擁有專業的酶聯研發團隊。利用專業的酶聯免疫技術自主研發的elisa試劑盒，能對血清及其它樣本定量檢測抗原，定性檢測特異性抗體。優質的試劑，先進的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。ELISA檢測的方便性、穩定性、重復性和可靠性方面都具有很大的優勢。
ELISA檢測技術服務內容：
1、雙抗體夾心法檢測抗原 2、間接法檢測抗體 3、為客戶提供各種ELISA技術進行樣本檢測。
以上代測費，凡購買本公司試劑盒，我們免費代測！
凡購買本公司目錄任何一種酶聯免疫檢測試劑盒，您只需將需要檢測的動物（Human, Rat, Mouse, Rabbit, Monkey,
Pig……）種類和檢測指標（白介素類、激素類）及標本數量（48T/96T）通知公司業務員即可。在接到客戶標本當日起，現貨產品一周內將檢測報告交到客戶手中！
歡迎各科研單位在各種項目上與我們公司開展不同層次的密切合作，以雙贏求發展，共同進步，為中國檢測事業的發展積累經驗。
二、樣本要求
在收集標本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。我們提倡新鮮標本盡早檢測，對收集后當天就進行檢測的標本，及時儲存在4℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本，請造模取材后，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差，蛋白極易降解，直接影響實驗質量，所以避免反復凍融。代測放免標本的客戶取材前須向我司銷售人員索要說明書，具體操作注意事項請與我司技術人員溝通。
液體類標本：標本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等。
血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。收集上清。如有沉淀形成，應再次離心。
血漿：應根據試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，加入10%（v/v）抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1%heparin
或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。如有沉淀形成，應再次離心。
尿液、胸腹水、腦脊液：用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。如有沉淀形成，應再次離心。
細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.0-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin（抑肽酶）。用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清置于-20度或-70度保存，如有必要，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
三、寄標本時需注明以下情況：
1、標本編號；2、所測項目；3、是否做復孔；3、聯系方式；4、實驗后標本是否寄回。
客戶須知：
客戶應對所提供的材料及信息負責，如因客戶提供的材料及信息不準確而引起的實驗延誤或經濟損失由客戶承擔。
為什么要進行細胞系的STR鑒定
什么是細胞系鑒定？
所謂細胞系鑒定即通過
STR（短串聯重復）圖譜所建立細胞系的遺傳特征。一株細胞系的遺傳特征確立后，細胞系可以通過定期的檢測，以防止出現細胞系被誤認或交叉污染的情況。
為什么要進行細胞系鑒定？
首先進行細胞系
STR鑒定是很重要的。很多生物醫藥的研究都采用培養細胞來進行，據估計，15-20%的實驗室，實驗中所使用的細胞已經不是原來的細胞系，或者與其它細胞系發生了交叉污染。顯然，細胞系遭到污染、特征鑒別錯誤，將會極大的威脅著基于這些細胞而發表的論文質量和研究發現的正確性。為此，很多細胞庫現在都要對提交來的細胞系進行鑒定，并對細胞系之間的交叉污染進行監測。
什么細胞最容易污染別的細胞？
Hela細胞。五十多年來，Hela細胞系被廣泛用于醫學和生物學領域的研究，對當代生命科學的發展屢建奇功，是名副其實的生物學研究的親歷踐行者。同時很多被廣泛研究的細胞系都被Hela細胞淹沒，因為她長得快，當你發現自己的一個培養瓶里的細胞突然長得很好，而以后都用它傳代做實驗的話，十之八九是搞錯了。
早在1967年，遺傳學家StanleyGartler發現HEp-2和INT407這兩種細胞系都是生物學領域研究最多的腫瘤細胞系——Hela細胞。
有哪些細胞曾被
Hela污染？
lnt-407、HEp-2、WISH（人羊膜細胞）、Acc-M（人原發性延腺癌細胞）、Bcap-37
（人乳腺癌細胞）、HAC-84（人肺腺癌克?。?、Hepatoma（人肝癌細胞）、HUL-42（人肺腺癌細胞）、CNE（人鼻咽癌細胞）、SPC-A-1（人肺腺癌細胞）、Tca-8113（人舌鱗癌細胞）、YTMLC（個舊肺鱗癌細胞）等一百余種。
如何進行細胞系鑒定？
細胞系鑒定目前主要基于國際身份認證委員會的標準。依據該標準，可以通過多重熒光
PCR技術，對人源8個STR位點以及1個性別決定位點進行檢測。我公司做的STR 鑒定，除以上9個位點之外，將對檢測細胞加做12個其它位點信息。
什么時候需細胞系鑒定？
1）當建立或獲得一個新的細胞系時；
2）一個涉及到細胞試驗項目開始/結束時；
3）在細胞凍存之前，或細胞已連續培養2～3個月時；
4）發表文章或申請課題經費前；
5）細胞系表現不穩定或結果與預期差別較大時；
6）當實驗室使用超過一種細胞系時，所有細胞系應先鑒定以排除交叉污染的可能。
如何提供鑒定樣本？
我公司建議客戶對每種進行檢測的目的細胞復蘇好
T25培養瓶寄送活細胞，或者對每種需要進行檢測的細胞單獨收集在1.5ml離心管中，細胞數目不少于10的6次方個。細胞需要離心沉淀，并且以PBS清洗盡可能去除上清培養基，沉淀進行冰凍（干冰）保存與寄送。（推薦復蘇好T25培養瓶常溫寄送活細胞，細胞數目不少于10的6次方個）
如何知道細胞系是否發生交叉污染了？
如果存在細胞系之間發生交叉污染，而且鑒定用的細胞可能有兩種以上的細胞系時，那么在進行
STR位點檢測的時候，多個位點會出現兩個以上的峰。峰高值表示該等位基因的信號強度，理論上峰值與樣本的DNA濃度有直接的關系。因此，存在交叉污染的混合細胞系中，其中一個位點中某些峰會明顯高于其他的峰，其中大峰是屬于混合細胞系中那個主要細胞系，而小峰則屬于那個次要細胞系。值得注意的是，當發生兩個或以上細胞混合的時候，檢測結果看起來非常像細胞系的“遺傳不穩定”——當一個細胞系存在亞群時，尤其是一些癌細胞系，由于遺傳不穩定的存在，在一些位點的STR特性會不同。因此經驗豐富的分子專家是非常重要的，他能夠幫助分析復雜的電泳圖譜（STR峰圖），從而判斷是否由于發生細胞系交叉污染而導致多等位基因情況。
如何根據
STR數據判斷細胞系的身份？
收到細胞系鑒定結果以及
STR信息，可以與參考數據庫進行比對。如果細胞樣本的每個STR位點和參考細胞STR位點都能重合匹配，即說明該細胞系正確，反之則說明你的細胞系可能被錯誤標記，交叉污染或發生遺傳不穩定。一般說來，匹配度≥80%即可認為該細胞系正確，匹配度＜80%則說明該細胞系的來源需要被懷疑。
提 示 :
如果細胞系被鑒定出發生交叉污染或錯誤標記，則需要拿更早代數的細胞進行鑒定，從而找到問題的起源或者直接從可靠的機構購買一株新的細胞系。
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