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人骨髓造血干細胞主圖

人骨髓造血干細胞

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  • 貨 號:ml098397
  • 5×10?Cells/T25培養瓶
    規 格:
    ¥7880.00元
    價 格:
  • 快速詢價     QQ:2881505708 免費咨詢電話:021-54461587 / 021-54461730
    【友情提示】:產品價格與說明書請點擊上面的鏈接,在線詢價,索要說明書;
  • 重要提示:因產品不斷更新,官網說明書如與紙質版有出入,請以紙質版為準! 購買前請務必讓業務員單獨給一份最新電子版說明書!
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人骨髓造血干細胞

產品簡介: 

產品名稱 : 人骨髓造血干細胞

產品品牌 : 酶聯生物

組織來源 : 骨髓組織

產品規格 : 5×105cells/T 25細胞培養瓶

細胞簡介: 

人骨髓造血干細胞分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質間的網眼中,是一種海綿狀的組織,能產生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。

造血干細胞具有自我更新能力并能分化為各種血細胞的前提細胞,最終生成各種血細胞成分,包括紅細胞,白細胞和血小板。造血干細胞需要根據機體的生理需求適時的補充血液系統各個成熟細胞組分。同時在損傷、炎癥等應激狀態下,造血干細胞也扮演著調節和維持體內血液系統各個細胞組分的生理平衡的角色。臨床治療中,造血干細胞移植廣泛應用于血液系統疾病以及自身免疫疾病,在其它實體瘤的治療中,比如淋巴瘤,生殖細胞瘤,乳腺癌,小細胞肺癌,主要應用于常規治療失敗或復發難治以及具有不良預后因素的患者。

造血干細胞以不對稱有絲分裂方式進行增殖,一個干細胞分裂產生兩個子細胞,一個分化為造血祖細胞,另一個則保持干細胞特征。造血干細胞在不斷體外培養產生大量造血祖細胞同時,保持自己既不增殖也不分化。體外培養微環境合適,造血干細胞可持續維持培養 60 天左右。 造血干細胞體外增殖培養需要基質細胞滋養(滋養層細胞),缺 少滋養層細胞不增殖,無法長期培養,產品為收集培養好的造血干懸浮細胞灌裝發貨,不包含滋養層,因此收貨后建議盡快實驗。

方法簡介: 

酶聯生物實驗室分離的人骨髓造血干細胞采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結合培養基篩選制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶 。

質量檢測: 

酶聯生物實驗室分離的人骨髓造血干細胞經C D 34免疫熒光鑒定,純度可達90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息: 

培 養 基 : 含FBS、SC F、IL-3、TPO 、Penicillin、Streptom ycin等

換液頻率 : 每2-3天換液一次

生長特性 : 懸浮

細胞形態 : 圓形 

傳代特性 : 不建議傳代

培養條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%

人骨髓造血干細胞體外培養周期有限;建議使用酶聯生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。

細胞培養狀態: 

發貨時發送細胞電子版照片

使用方法: 

人骨髓造血干細胞是一種懸浮細胞,細胞形態呈圓形,在酶聯生物技術部標準操作流程下,細胞不建議傳代;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。

客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作: 

1.取出T 25細胞培養瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。

2.懸浮細胞處理

1)收集T25細胞培養瓶中的培養基至50ml離心管中,用PBS清洗細胞培養瓶1-2次,收集清洗液。

2)1200-1500rpm 離心3min,棄上清,收集細胞沉淀。

3)加入5ml新鮮完全培養基,用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞;將分散好的細胞調整合適密度接種至培養器皿中,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;

4)待細胞狀態穩定后,培養觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。

3. 復蘇操作說明

1. 準備好37度水浴鍋,預熱至37度。

2. 準備好T25培養瓶,加入10ml完全培養基(培養基量必須大于凍存液10倍體積)。

3. 取出干冰內凍存細胞管,用EP手套包裹凍存管(防止管內進水導致污染),迅速放于水浴鍋內,于1min內融化完全。

4.取出凍存管,酒精噴灑消毒后擦干,置于超凈臺內。

5.吸取凍存管內細胞懸液,加入步驟2中準備好的T25培養瓶內,8字緩慢搖勻。

6.培養瓶放于37度C O 2恒溫培養箱內,靜置培養24h,更換新鮮換培養基(注意貼壁細胞、懸浮細胞不同換液操作方法)。

注意事項: 

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和酶聯生物技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

特殊注意事項: 

6.此細胞為懸浮細胞,請注意不要直接倒掉,造成損失;懸浮細胞因多數胞體較小,離心收集時,請注意懸液中細胞是否收集完全,可適當加大離心轉速200轉或增加離心時間3-5m in,增加細胞獲取量。為維持細胞干性,發貨細胞瓶內只灌裝1/3-1/2液體,請注意并非漏液。

用戶評論(共6條評論)

  • 辦事效率蠻高,幾天,就幫我搞定了這個試劑盒,謝謝!
  • 盒子蠻不錯,包含所需試劑,并提供了中英文雙版說明書及增值稅發票,很正規,銷售人員的態度也謙和。
  • 靈敏度不錯,重復性也行,試劑盒在我做的這些實驗中,與國內同行的盒子相比來說,性價比挺高的,尤其是價格占有不錯的優勢,贊一個!
  • 操作挺方便的,也簡單,當然,這也多虧了公司的技術人員詳細的實驗指導,很好,謝謝,實驗也相當成功。
  • 實驗出來的標準曲線很不錯(很優美),而且價格相對合理,技術指導很到位......
  • 我購買了兩盒,批次最新,保質期內,實驗結果做出來了,貨到的挺快,那么遠,幾天就到了,加上我做實驗,一共五天就搞定了。
  • 經朋友介紹,購買了此公司的ELISA試劑盒,用過,還不錯,實驗效果很好,基本達到實驗參數要求,如果,下次還做實驗的話,我還買這家的,朋友這幾年都在用這家的(長期訂貨)。

酶聯生物經過不斷的實驗優化和改進,積累了大量的經驗,擁有專業的酶聯研發團隊。利用專業的酶聯免疫技術自主研發的elisa試劑盒,能對血清及其它樣本定量檢測抗原,定性檢測特異性抗體。優質的試劑,先進的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。ELISA檢測的方便性、穩定性、重復性和可靠性方面都具有很大的優勢。

ELISA檢測技術服務內容:
1、雙抗體夾心法檢測抗原 2、間接法檢測抗體 3、為客戶提供各種ELISA技術進行樣本檢測。

以上代測費,凡購買本公司試劑盒,我們免費代測!
凡購買本公司目錄任何一種酶聯免疫檢測試劑盒,您只需將需要檢測的動物(Human, Rat, Mouse, Rabbit, Monkey, Pig……)種類和檢測指標(白介素類、激素類)及標本數量(48T/96T)通知公司業務員即可。在接到客戶標本當日起,現貨產品一周內將檢測報告交到客戶手中!
歡迎各科研單位在各種項目上與我們公司開展不同層次的密切合作,以雙贏求發展,共同進步,為中國檢測事業的發展積累經驗。

二、樣本要求
在收集標本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。我們提倡新鮮標本盡早檢測,對收集后當天就進行檢測的標本,及時儲存在4℃備用,如有特殊原因需要周期收集標本,請造模取材后,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差,蛋白極易降解,直接影響實驗質量,所以避免反復凍融。代測放免標本的客戶取材前須向我司銷售人員索要說明書,具體操作注意事項請與我司技術人員溝通。

液體類標本:標本必須為液體,不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等。

血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。收集上清。如有沉淀形成,應再次離心。

血漿:應根據試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入10%(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1%heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。如有沉淀形成,應再次離心。

尿液、胸腹水、腦脊液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。如有沉淀形成,應再次離心。

細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.0-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶)。用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清置于-20度或-70度保存,如有必要,可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

三、寄標本時需注明以下情況:
1、標本編號;2、所測項目;3、是否做復孔;3、聯系方式;4、實驗后標本是否寄回。

客戶須知:
客戶應對所提供的材料及信息負責,如因客戶提供的材料及信息不準確而引起的實驗延誤或經濟損失由客戶承擔。

原代細胞培養 

組織塊直接培養法

1.  取材,用 Hank's液洗滌三次,并剔除脂肪,結締組織,血液等雜物。

2.  用手術剪將組織剪切成 1mm3左右的小塊,再用Hank's液洗三次。

3. 將組織塊轉移至培養瓶,并貼附于瓶底面。

4.  輕輕將培養瓶翻轉,瓶底朝上,向瓶內注入適量的培養液,將培養瓶放置在 37℃恒溫箱內培養。

5.  放置待組織小塊貼附后,將培養瓶慢慢翻轉平放,使組織浸入培養液中 37℃繼續培養。

消化培養法

1.  取材,用 Hank's液洗滌三次,并剔除脂肪,結締組織,血液等雜物。

2.  用手術剪將組織剪切成 1mm3左右的小塊,再用Hank's液洗三次。

3.  視組織塊量加入酶液, 37℃中消化20—40分鐘,每隔5分鐘振蕩一次,或用吸管吹打一次,使細胞分離。

4.  加入 3—5ml培養液以終止酶消化作用(或加入相關酶抑制劑)。

5.  靜置 5—10分鐘,使未分散的組織塊下沉,取懸液加入到離心管中。

6. 1000rpm,離心10分鐘,棄上清液。

7.  加入 Hank's液5ml,沖散細胞,再離心一次,棄上清液。

8.  加入培養液 1—2ml(視細胞量),血球計數板計數。

9.  將細胞轉移到培養瓶中, 37℃下培養。

器官培養法

1.  將不銹網做成支架形狀,調整其高度至培養皿的 1/2深度平面,在其表面放置0.5μm孔徑濾膜。

2. 將培養液加入培養皿中,使液面剛剛接觸到濾膜,但不要使其浮起。

3.  將要培養器官組織放在濾膜上,一般厚度不要超過 200μm,水平面積不超過10mm2。

4.  將上述準備好的培養物放入 CO2培養箱,并加注氧氣調整氧分壓,建議到90%。

5. 培養過程中要注意觀察培養液平面,盡可能保持在與濾膜一致的水平上。

6.  上述可進行器官培養 1-3周,每2-3天換液一次,并根據情況做進一步實驗和檢測。