無蛋白細胞凍存液
產品簡介
上海酶聯生物供應的無蛋白細胞凍存液,是一種新型的快速凍存細胞的保護液,可將細胞置于-80℃直接冷凍保存。內含天然抗凍蛋白(Natural antifreeze protein),不含動物來源的血清成分,能夠有效提高細胞凍存活率和復蘇活力,減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細胞安全,能夠滿足大部分體外培養細胞的凍存需求。
產品特色
1. 即開即用,方便省時。
2. 無血清成分,化學成分明確。
3. 快速冷凍,可直接置于-80℃冰箱冷凍。
4. 高復蘇活率,有效保護細胞。
已驗證細胞
目前已驗證的細胞:CHO,MCF-7, HepG2, SK-OV-3, MDCK,NIH-3T3,HUVEC, HEK-293,Hela,A549,NCI-H460,HUSMC, BMSC,PC12,RAW264.7, C2C12,CHO,COS7,DU145等50余種, 細胞復蘇活率高達90%以上 。
使用方法
1. 收集懸浮細胞或貼壁細胞,離心去除上清培養液。
2. 加入適量的細胞凍存液,重懸細胞,調節密度至1~5×106個/mL。
3. 將加有凍存液的細胞懸液分裝至凍存管中。
4. 將凍存管直接轉移至-80ºC冰箱中冷凍保存。
儲存條件
2~8℃保存,一年有效;-20℃保存,兩年有效。
注意事項
1. 請選擇對數生長期細胞進行凍存。
2. 凍存液加入細胞后,請盡快放入-80℃冰箱凍存。
3. 本產品凍存細胞可以在-80℃冰箱保存3年以上。
4. 若需長期凍存細胞,請轉移至液氮罐中貯存。
5. 凍存液中含DMSO成分,為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套。
用戶評論(共6條評論)
酶聯生物經過不斷的實驗優化和改進,積累了大量的經驗,擁有專業的酶聯研發團隊。利用專業的酶聯免疫技術自主研發的elisa試劑盒,能對血清及其它樣本定量檢測抗原,定性檢測特異性抗體。優質的試劑,先進的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。ELISA檢測的方便性、穩定性、重復性和可靠性方面都具有很大的優勢。
ELISA檢測技術服務內容:
1、雙抗體夾心法檢測抗原 2、間接法檢測抗體 3、為客戶提供各種ELISA技術進行樣本檢測。

以上代測費,凡購買本公司試劑盒,我們免費代測!
凡購買本公司目錄任何一種酶聯免疫檢測試劑盒,您只需將需要檢測的動物(Human, Rat, Mouse, Rabbit, Monkey,
Pig……)種類和檢測指標(白介素類、激素類)及標本數量(48T/96T)通知公司業務員即可。在接到客戶標本當日起,現貨產品一周內將檢測報告交到客戶手中!
歡迎各科研單位在各種項目上與我們公司開展不同層次的密切合作,以雙贏求發展,共同進步,為中國檢測事業的發展積累經驗。
二、樣本要求
在收集標本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。我們提倡新鮮標本盡早檢測,對收集后當天就進行檢測的標本,及時儲存在4℃備用,如有特殊原因需要周期收集標本,請造模取材后,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差,蛋白極易降解,直接影響實驗質量,所以避免反復凍融。代測放免標本的客戶取材前須向我司銷售人員索要說明書,具體操作注意事項請與我司技術人員溝通。
液體類標本:標本必須為液體,不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等。
血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。收集上清。如有沉淀形成,應再次離心。
血漿:應根據試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入10%(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1%heparin
或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。如有沉淀形成,應再次離心。
尿液、胸腹水、腦脊液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。如有沉淀形成,應再次離心。
細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.0-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶)。用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清置于-20度或-70度保存,如有必要,可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
三、寄標本時需注明以下情況:
1、標本編號;2、所測項目;3、是否做復孔;3、聯系方式;4、實驗后標本是否寄回。
客戶須知:
客戶應對所提供的材料及信息負責,如因客戶提供的材料及信息不準確而引起的實驗延誤或經濟損失由客戶承擔。
貼壁培養與懸浮培養選哪個?
細胞培養的優勢在于能夠控制細胞繁殖的物理化學環境(
即溫度、
pH值、滲透壓、O2和CO2張力
)和生理環境(即激素和營養濃度
)。除溫度外,培養環境由生長培養基控制。雖然細胞培養的生理環境不如其物理化學環境明確,但是通過更好地了解血清成分、確定增殖所需的生長因子以及更好地了解培養過程中的細胞微環境(即細胞間相互作用、氣體擴散、細胞
-基質相互作用),現在
酶聯生物可以采用無血清培養基進行一些細胞系的培養。
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目前主要有兩種基本的細胞培養體系
1. 一種是使細胞在人工基質上單層生長(貼壁培養)。
2. 一種是使細胞在培養基中自由漂浮生長(懸浮培養)。
貼壁培養
來自脊椎動物的大多數細胞,除了造血細胞系和少數其他細胞系,都是貼壁依賴性的,必須在經過專門處理以允許細胞粘附和擴散的合適基質上培養。
懸浮培養
但許多細胞系也可采用懸浮培養。大多數市售昆蟲細胞系在單層或懸浮培養物中生長良好。懸浮培養細胞可在未經組織培養處理的培養瓶中培養,但隨著培養物體積與表面積之比(通常為
0.2-0.5mL/cm2)的增加,阻礙了氣體的充分交換,因此需要對培養基進行攪拌。這種攪拌
一般通過磁力攪拌器或者旋轉瓶實現。
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以下是貼壁培養與懸浮培養兩種培養方式在適用類型,傳代方式,采用酶法,細胞生長,培養方法,實驗結果方面的詳細對比。
貼壁培養
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懸浮培養
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需要使用經過組織培養處理的容器
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無需通過酶法或機械方法解離細胞
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細胞生長受到表面積限制 ,
從而可能限制細胞產量
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細胞生長受到培養基中細胞濃度的限制 ,
易于擴大規模培養
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包括原代細胞在內的大多數細胞類型
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適應懸浮培養的細胞和其他一些無粘附性的細胞(如造血細胞)
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需要定期傳代 ,
但易于在倒置顯微鏡下進行目視檢驗
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較易傳代但需要每天進行細胞計數和存活率測定
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可連續收獲產物 ,
用于細胞學研究等多種研究應用
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可在未經組織培養處理的培養容器中進行培養 ,
需要攪動以便進行充分氣體交換
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總 結 : 細胞的后續實驗往往決定了細胞培養的形式和培養基,除了經過標準組織培養處理和未經處理的表面外,還使用了其他表面改良技術來獲得預期的細胞培養結果。