基本信息
細(xì)胞品牌 : 酶聯(lián)生物
種屬來源 : 人
細(xì)胞編號(hào) : ml-CC2033
組織來源 : 乳腺，乳房
生長特性 : 貼壁生長
細(xì)胞形態(tài) : 上皮細(xì)胞樣
重要提醒 : 培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基是不含藥物的，待細(xì)胞狀態(tài)良好，穩(wěn)定生長時(shí)，可以用含加含400ng/ml的阿霉素藥物培養(yǎng)基來培養(yǎng)，期間會(huì)有少部分細(xì)胞懸浮起來，屬于正常情況，通過換液去掉即可。待細(xì)胞穩(wěn)定生長傳2代后，使用的阿霉素藥物濃度可提高到500ng/ml，凍存時(shí)請(qǐng)不要在培養(yǎng)基中加藥物。
是否導(dǎo)耐藥基因 : 是
細(xì)胞代數(shù) : 10代以內(nèi)
細(xì)胞規(guī)格 : 1x10?cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測(cè) : 無
培 養(yǎng) 基 : 89%DMEM+10%FBS+1%PS+0.01mg/ml insulin+500ng/ml ADR
培養(yǎng)條件 : 氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件 : 無血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
細(xì)胞貨期 : 現(xiàn)貨，1周左右
發(fā)貨方式 : 復(fù)蘇發(fā)貨（免運(yùn)輸費(fèi)用）/ 凍存發(fā)貨（需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用）
供應(yīng)范圍 : 僅限于科研實(shí)驗(yàn)使用，絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
特別說明 : 具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主
細(xì)胞培養(yǎng)操作
T25瓶
收貨處理 : 觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁，將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)
傳代密度 : 細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)
傳代比例 : 首次傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿
傳代方法 :
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-3 min（視細(xì)胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，加2-3ml完全培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
注意事項(xiàng)
1.運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。
2.因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象
凍存管
收貨處理 : 收到細(xì)胞后，需立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇
傳代密度 : 第二天換液并檢查細(xì)胞密度
傳代比例 : 一管細(xì)胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶
傳代方法 : 將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心5 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL完全培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。
注意事項(xiàng)
1.收貨時(shí)若發(fā)現(xiàn)干冰化完，檢查凍存管是否融化，若已融化需直接離心細(xì)胞接種觀察，若未融化可以將細(xì)胞按正常步驟保存。
2.為保證細(xì)胞的高存活率，收到產(chǎn)品后，請(qǐng)立即解凍復(fù)蘇細(xì)胞。
細(xì)胞凍存操作
凍存液配方 : 無血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
細(xì)胞密度 : 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。
下面T25瓶為例
凍存方法
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，加1 mL血清重懸細(xì)胞，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5x106~1x107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。。
注意事項(xiàng)
凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性，若有異常，及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案
售后服務(wù)
細(xì)胞予重發(fā)
1. 細(xì)胞運(yùn)輸中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等，重發(fā)。
2. 收到細(xì)胞未開封，如出現(xiàn)污染狀況，重發(fā)。
3. 收到細(xì)胞3天內(nèi)，發(fā)現(xiàn)污染問題，經(jīng)核實(shí)后，重發(fā)。
4. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置2小時(shí)后，干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，經(jīng)核實(shí)后，重發(fā)。
5. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置22小時(shí)并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后，出現(xiàn)污染，經(jīng)核實(shí)后，重發(fā)。
6. 細(xì)胞活性問題，請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品3天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，經(jīng)核實(shí)后，重發(fā)。
細(xì)胞不重發(fā)
1. 客戶操作造成細(xì)胞污染，不重發(fā)。
2. 客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。
3. 非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。
4. 細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供真實(shí)清晰的培養(yǎng)前3天的細(xì)胞狀態(tài)照片，不重發(fā)。
5. 細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的，不重發(fā)。
6. 收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時(shí)間證明大于3天的，不重發(fā)。
特別說明
客戶買細(xì)胞就找上海酶聯(lián)生物，穩(wěn)定傳代，無污染，包存活，提供整體課題外包服務(wù)，光學(xué)成像，流式實(shí)驗(yàn)，電鏡實(shí)驗(yàn)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，病理實(shí)驗(yàn)，分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)等，嚴(yán)格把控產(chǎn)品質(zhì)量，所有細(xì)胞產(chǎn)品均有細(xì)胞鑒別、無菌檢查、支原體檢查，為科研人員提供可靠放心的產(chǎn)品。
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