基本信息
細胞品牌 : 酶聯生物
種屬來源 : 人
細胞編號 : ml-CC2038
組織來源 : 肺
生長特性 : 貼壁生長
細胞形態 : 上皮細胞樣
特別提醒 : 待細胞長到70-80%的匯合度時，去掉培養液，加入含 500ng/ml DDP 藥物的培養液，放入培養箱，這段時間肯定會有小部分細胞懸浮起來，但是不要緊，通過換液可以去掉，下面的細胞待長滿就可以消化傳瓶了，這時可以一直用含藥培養液來消化培養細胞，一兩代之后可以將藥物濃度提高到 1000ng/ml，含藥培養液用于細胞培養都沒問題的，凍存的時候就不要在凍存液里面加藥物了。(注明：用不含藥物培養基培養一周到兩周，再用含藥培養基培養。)
是否導耐藥基因 : 否
細胞代數 : 10代以內
細胞規格 : 1x10?cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測 : 無
培養基 : 90% DMEM+10% FBS+PS
培養條件 : 氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件 : 無血清凍存液，液氮儲存
細胞貨期 : 現貨，1周左右
發貨方式 : 復蘇發貨（免運輸費用）/ 凍存發貨（需加干冰運輸費用）
供應范圍 : 僅限于科研實驗使用，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用
特別說明 : 具體操作步驟以隨貨產品說明書為主
細胞培養操作
T25瓶
收貨處理 : 觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁，將T25瓶置于37度培養箱放置2-4h，以便穩定細胞狀態
傳代密度 : 細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養
傳代比例 : 首次傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法
a、棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養瓶置于37℃培養箱中消化1-3 min（視細胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加2-3ml完全培養基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養液后吹勻。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養基的新皿中或者瓶中，置于培養箱中培養。
注意事項
1.運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。
2.因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常現象。
凍存管
收貨處理 : 收到細胞后，需立即轉入液氮凍存或直接復蘇
傳代密度 : 第二天換液并檢查細胞密度
傳代比例 : 一管細胞建議接種到10cm培養皿或者T25瓶
傳代方法 : 將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養基，培養過夜）第二天換液并檢查細胞密度。
注意事項
1.收貨時若發現干冰化完，檢查凍存管是否融化，若已融化需直接離心細胞接種觀察，若未融化可以將細胞按正常步驟保存。
2.為保證細胞的高存活率，收到產品后，請立即解凍復蘇細胞。
細胞凍存操作
凍存液配方 : 無血清凍存液，液氮儲存
細 胞 密 度 : 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。
下面T25瓶為例
凍存方法
1. 收集細胞及細胞培養液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，加1 mL血清重懸細胞，進行細胞計數。
2.根據細胞數量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
3.將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
注意事項
凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性，若有異常，及時調整實驗方案
售后服務
細胞予重發
1. 細胞運輸中遭遇的各種問題，細胞丟失瓶身破損、培養液嚴重漏液等，重發。
2. 收到細胞未開封，如出現污染狀況，重發。
3. 收到細胞3天內，發現污染問題，經核實后，重發。
4. 常溫發貨的細胞靜置2小時后，干冰凍存發貨的細胞復蘇2天后，絕大多數細胞未存活，經核實后，重發。
5. 常溫發貨的細胞靜置22小時并且未開封或干冰凍存發貨的細胞復蘇2天后，出現污染，經核實后，重發。
6. 細胞活性問題，請在收到產品3天內給我們提出真實的實驗結果，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，經核實后，重發。
細胞不重發
1. 客戶操作造成細胞污染，不重發。
2. 客戶嚴重操作失誤致細胞狀態不好，不重發。
3. 非我們推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好，不重發。
4. 細胞狀態不好，未提供真實清晰的培養前3天的細胞狀態照片，不重發。
5. 細胞培養時經其它處理導致細胞出現問題的，不重發。
6. 收到細胞發現問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的，不重發。
特別說明
客戶買細胞就找上海酶聯生物，穩定傳代，無污染，包存活，提供整體課題外包服務，光學成像，流式實驗，電鏡實驗，動物實驗，病理實驗，分子生物學實驗，細胞實驗等，嚴格把控產品質量，所有細胞產品均有細胞鑒別、無菌檢查、支原體檢查，為科研人員提供可靠放心的產品。
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