基本信息
細胞編號 :ml-CC2218
細胞品牌 :酶聯生物
細胞簡介 :Luciferase RM-1細胞穩定表達螢火蟲熒光素酶。該細胞株性狀穩定,培養時不需要添加抗生素維持。可用作螢火蟲熒光素酶活性檢測中的陽性對照,也可用于活體動物成像實驗。該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶Luc基因用Zipras/myc9逆轉錄病毒感染17天齡C57BL/6胚胎的泌尿生殖竇細胞,并將其移植到同基因成年雄性小鼠的腎被膜下。
細胞規格 :1x10?cells/T25培養瓶或者1mL凍存管
種屬來源 :小鼠
組織來源 :前列腺
細胞形態 :上皮細胞樣
puro藥篩濃度 :RM-1-LUC-PURO細胞puro藥篩濃度為1.0ug/ml,培養過程中可不用再添加puro,如若擔心抗性隨著傳代時間降低,可定期用0.5ug/ml濃度puro維持
生物安全等 :2
生長特性 :貼壁生長
培養條件 :氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
保藏機構 :ATCC; CRL-3310
培 養 基 :90%RPMI-1640+10% FBS+PS
凍存條件 :無血清凍存液,液氮儲存
細胞貨期 :現貨,1周左右
發貨方式 :復蘇發貨(T25瓶免運輸費用)/ 凍存發貨(需加干冰運輸費用)
供應范圍 :僅限于科研實驗使用,不可用于其它用途
細胞培養操作
T25瓶
收貨處理 :
觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁,將T25瓶置于37度培養箱放置2-4h,以便穩定細胞狀態
傳代密度 :
細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養
傳代比例 :
首次傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法 :
a、棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,使消化液浸潤所有細胞,棄去消化液,將培養瓶置于37℃培養箱中消化1 min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
c、按6-8 mL/瓶補加培養基,輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心4 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養液后吹勻。
d、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養基的新皿中或者瓶中,置于培養箱中培養。
注意事項 :
1. 運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。
2. 因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常現象。
凍存管
收貨處理 :
到細胞后,需立即轉入液氮凍存或直接復蘇
傳代密度 :
第二天換液并檢查細胞密度
傳代比例 :
一管細胞建議接種到10cm培養皿或者T25瓶
傳代方法 :
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10 cm皿中,加入約8mL培養基,培養過夜)第二天換液并檢查細胞密度。
注意事項 :
1. 收貨時若發現干冰化完,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細胞接種觀察,若未融化可以將細胞按正常步驟保存。
2. 為保證細胞的高存活率,收到產品后,請立即解凍復蘇細胞。
細胞凍存操作
凍存液配方 :
無血清凍存液,液氮儲存
細胞密度 :
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例
凍存方法 :
a、收集細胞及細胞培養液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數。
b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5x10?~1x10?/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
注意事項 :
凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調整實驗方案
售后服務
細胞予重發
1. 細胞運輸中遭遇的各種問題,細胞丟失瓶身破損、培養液嚴重漏液等,重發。
2. 收到細胞未開封,如出現污染狀況,重發。
3. 收到細胞3天內,發現污染問題,經核實后,重發。
4. 常溫發貨的細胞靜置2小時后,干冰凍存發貨的細胞復蘇2天后,絕大多數細胞未存活,經核實后,重發。
5. 常溫發貨的細胞靜置22小時并且未開封或干冰凍存發貨的細胞復蘇2天后,出現污染,經核實后,重發。
6. 細胞活性問題,請在收到產品3天內給我們提出真實的實驗結果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,經核實后,重發。
細胞不重發
1. 客戶操作造成細胞污染,不重發。
2. 客戶嚴重操作失誤致細胞狀態不好,不重發。
3. 非我們推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發。
4. 細胞狀態不好,未提供真實清晰的培養前3天的細胞狀態照片,不重發。
5. 細胞培養時經其它處理導致細胞出現問題的,不重發。
6. 收到細胞發現問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發。
特別說明
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上海酶聯生物,穩定傳代,無污染,包存活,提供整體課題外包服務,光學成像,流式實驗,電鏡實驗,動物實驗,病理實驗,分子生物學實驗,細胞實驗等,嚴格把控產品質量,所有細胞產品均有細胞鑒別、無菌檢查、支原體檢查,為科研人員提供可靠放心的產品。