基本信息
細(xì)胞編號(hào) ：ml-CC2229
細(xì)胞品牌 ：酶聯(lián)生物
細(xì)胞簡(jiǎn)介 ：Luciferase SKOV3細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)螢火蟲熒光素酶。該細(xì)胞株性狀穩(wěn)定，培養(yǎng)時(shí)不需要添加抗生素維持。可用作螢火蟲熒光素酶活性檢測(cè)中的陽(yáng)性對(duì)照，也可用于活體動(dòng)物成像實(shí)驗(yàn)。SK-OV-3-LUC-EGFP細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。
SK-OV-3細(xì)胞是由G.Trempe和L.J.Old于1973年從卵巢腫瘤病人的腹水分離得到。SK-OV-3細(xì)胞對(duì)腫瘤壞死因子和幾種細(xì)胞毒性藥物包括白喉毒素、順鉑和阿霉素均耐受。SK-OV-3細(xì)胞在裸鼠中致瘤，且形成與卵巢原位癌一致的中度分化的腺癌。
細(xì)胞規(guī)格 ：1x10?cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管
種屬來源 ：人
組織來源 ：卵巢
細(xì)胞形態(tài) ：上皮細(xì)胞樣
puro藥篩濃度 ：SK-OV-3-LUC-EGFP細(xì)胞PURO藥篩濃度為4.0ug/ml，培養(yǎng)過程中可不用再添加PURO，如若擔(dān)心抗性隨著傳代時(shí)間降低，可定期用2ug/ml濃度PURO維持
細(xì)胞代數(shù) ：p3-p8
生物安全等 ：1
生長(zhǎng)特性 ：貼壁生長(zhǎng)
培養(yǎng)條件 ：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
保藏機(jī)構(gòu) ：ATCC; HTB-77 ECACC; 91091004
培 養(yǎng) 基 ：90% McCoy’s 5A+10% FBS+雙抗
凍存條件 ：無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
細(xì)胞貨期現(xiàn)貨，1周左右
發(fā)貨方式 ：復(fù)蘇發(fā)貨（T25瓶免運(yùn)輸費(fèi)用）/ 凍存發(fā)貨（需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用）
供應(yīng)范圍 ：僅限于科研實(shí)驗(yàn)使用，不可用于其它用途
細(xì)胞培養(yǎng)操作
Ｔ25瓶
收貨處理 ：
觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁，將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)
傳代密度 ：
細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)
傳代比例 ：
首次傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿
傳代方法 ：
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細(xì)胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml完全培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
注意事項(xiàng) ：
1. 運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。
2. 因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。
凍存管
收貨處理 ：
到細(xì)胞后，需立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇
傳代密度 ：
第二天換液并檢查細(xì)胞密度
傳代比例 ：
一管細(xì)胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶
傳代方法 ：
將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
注意事項(xiàng) ：
1. 收貨時(shí)若發(fā)現(xiàn)干冰化完，檢查凍存管是否融化，若已融化需直接離心細(xì)胞接種觀察，若未融化可以將細(xì)胞按正常步驟保存。
2. 為保證細(xì)胞的高存活率，收到產(chǎn)品后，請(qǐng)立即解凍復(fù)蘇細(xì)胞。
細(xì)胞凍存操作
凍存液配方 ：
無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
細(xì)胞密度 ：
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例
凍存方法 ：
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，加 1 mL血清重懸細(xì)胞，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5x10?~1x10?/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
注意事項(xiàng) ：
凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性，若有異常，及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案
售后服務(wù)
細(xì)胞予重發(fā)
1. 細(xì)胞運(yùn)輸中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等，重發(fā)。
2. 收到細(xì)胞未開封，如出現(xiàn)污染狀況，重發(fā)。
3. 收到細(xì)胞3天內(nèi)，發(fā)現(xiàn)污染問題，經(jīng)核實(shí)后，重發(fā)。
4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置2小時(shí)后，干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，經(jīng)核實(shí)后，重發(fā)。
5. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置22小時(shí)并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后，出現(xiàn)污染，經(jīng)核實(shí)后，重發(fā)。
6. 細(xì)胞活性問題，請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品3天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，經(jīng)核實(shí)后，重發(fā)。
細(xì)胞不重發(fā)
1. 客戶操作造成細(xì)胞污染，不重發(fā)。
2. 客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。
3. 非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。
4. 細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供真實(shí)清晰的培養(yǎng)前3天的細(xì)胞狀態(tài)照片，不重發(fā)。
5. 細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的，不重發(fā)。
6. 收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時(shí)間證明大于3天的，不重發(fā)。
特別說明
客戶買細(xì)胞就找
上海酶聯(lián)生物，穩(wěn)定傳代，無(wú)污染，包存活，提供整體課題外包服務(wù)，光學(xué)成像，流式實(shí)驗(yàn)，電鏡實(shí)驗(yàn)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，病理實(shí)驗(yàn)，分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)等，嚴(yán)格把控產(chǎn)品質(zhì)量，所有細(xì)胞產(chǎn)品均有細(xì)胞鑒別、無(wú)菌檢查、支原體檢查，為科研人員提供可靠放心的產(chǎn)品。
SK-OV-3-LUC-EGFP活性檢測(cè)報(bào)告(詳見說明書)
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