基本信息
細胞編號 ：ml-CC2219
細胞品牌 ：酶聯(lián)生物
細胞簡介 ：Luciferase ID8細胞穩(wěn)定表達螢火蟲熒光素酶。該細胞株性狀穩(wěn)定，培養(yǎng)時不需要添加抗生素維持。可用作螢火蟲熒光素酶活性檢測中的陽性對照，也可用于活體動物成像實驗。該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶Luc基因。
細胞規(guī)格 ：1x10?cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管
種屬來源 ：小鼠
組織來源 ：卵巢
細胞形態(tài) ：上皮細胞樣
puro藥篩濃度 ：ID8-LUC細胞puro藥篩濃度為1.0ug/ml，培養(yǎng)過程中可不用再添加puro，如若擔心抗性隨著傳代時間降低，可定期用0.5ug/ml濃度puro維持
生長特性 ：貼壁生長
培養(yǎng)條件 ：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
保藏機構 ：90% DMEM+10% FBS+雙抗
培 養(yǎng) 基 ：90% DMEM+10% FBS+PS
凍存條件 ：無血清凍存液，液氮儲存
細胞貨期 ：現(xiàn)貨，1周左右
發(fā)貨方式 ：復蘇發(fā)貨（T25瓶免運輸費用）/ 凍存發(fā)貨（需加干冰運輸費用）
供應范圍 ：僅限于科研實驗使用，不可用于其它用途
細胞培養(yǎng)操作
Ｔ25瓶
收貨處理 ：
觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁，將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)
傳代密度 ：
細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)
傳代比例 ：
首次傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法 ：
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02%EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-3 min（視細胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，用胰酶輕輕吹下來后，迅速后加2-3ml完全培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
注意事項 ：
1. 運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。
2. 因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。
凍存管
收貨處理 ：
到細胞后，需立即轉入液氮凍存或直接復蘇
傳代密度 ：
第二天換液并檢查細胞密度
傳代比例 ：
一管細胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶
傳代方法 ：
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）第三天換液并檢查細胞密度。
注意事項 ：
1. 收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完，檢查凍存管是否融化，若已融化需直接離心細胞接種觀察，若未融化可以將細胞按正常步驟保存。
2. 為保證細胞的高存活率，收到產(chǎn)品后，請立即解凍復蘇細胞。
細胞凍存操作
凍存液配方 ：
無血清凍存液，液氮儲存
細胞密度 ：
待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例
凍存方法 ：
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，加 1 mL血清重懸細胞，進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5x10?~1x10?/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
注意事項 ：
凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性，若有異常，及時調(diào)整實驗方案
售后服務
細胞予重發(fā)
1. 細胞運輸中遭遇的各種問題，細胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等，重發(fā)。
2. 收到細胞未開封，如出現(xiàn)污染狀況，重發(fā)。
3. 收到細胞3天內(nèi)，發(fā)現(xiàn)污染問題，經(jīng)核實后，重發(fā)。
4. 常溫發(fā)貨的細胞靜置2小時后，干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇2天后，絕大多數(shù)細胞未存活，經(jīng)核實后，重發(fā)。
5. 常溫發(fā)貨的細胞靜置22小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇2天后，出現(xiàn)污染，經(jīng)核實后，重發(fā)。
6. 細胞活性問題，請在收到產(chǎn)品3天內(nèi)給我們提出真實的實驗結果，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，經(jīng)核實后，重發(fā)。
細胞不重發(fā)
1. 客戶操作造成細胞污染，不重發(fā)。
2. 客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。
3. 非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。
4. 細胞狀態(tài)不好，未提供真實清晰的培養(yǎng)前3天的細胞狀態(tài)照片，不重發(fā)。
5. 細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導致細胞出現(xiàn)問題的，不重發(fā)。
6. 收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的，不重發(fā)。
特別說明
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上海酶聯(lián)生物，穩(wěn)定傳代，無污染，包存活，提供整體課題外包服務，光學成像，流式實驗，電鏡實驗，動物實驗，病理實驗，分子生物學實驗，細胞實驗等，嚴格把控產(chǎn)品質量，所有細胞產(chǎn)品均有細胞鑒別、無菌檢查、支原體檢查，為科研人員提供可靠放心的產(chǎn)品。
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